بدون شک مهمترین و پرکاربردترین روش جداسازی، روش “کروماتوگرافی” است.کروماتوگرافی از دو بخش کروماتو به معنای رنگ و گرافی به معنای ترسیم می باشد و نشانگر متد قدیمی تفکیک مواد بر اساس رنگ می باشد. در واقع دستگاهی است برای جداسازی، شناسائی و مقدار سنجی اجزای یک ترکیب، که با استفاده از حلال ها با فشار بسیار بالا استفاده شود.
تزریق نمونه، بسته به نوع دستگاه، به دو شکل دستی و یا خودکار انجام میگیرد. در روش خودکار، نمونه در ظروف مخصوصی ریخته شده و در محل تعبیه شده در دستگاه قرار میگیرد. پس از اینکه اپراتور دستور تزریق را (از طریق نرمافزار) میدهد، نمونه توسط یک سرنگ به سیستم منتقل میشود.در روش دستی، از سرنگهایی با ظرفیتهای مختلف برای تزریق نمونه استفاده میشود. حجم نمونه تزریق شده (در هر دو روش)، به حجم حلقه نمونهبردار (Loop) بستگی دارد.
به منظور انتقال حلال و همچنین نمونه در فضای ستون، نیاز به ایجاد فشاری در سیستم است که برای ایجاد آن حداقل از یک پمپ استفاده میشود. حلال (فاز متحرک) توسط پمپ با سرعت و جریان ثابتی بر روی فاز ساکن حرکت داده میشود. فشار سیستم به اندازه (سایز) ذرات موجود در ستون، گرانروی (Viscosity) و سرعت جریان فاز متحرک بستگی دارد. بسته به نوع جداسازی، میزان سرعت جریان فاز متحرک تعیین میگردد.در مواردی که با تعددی از آنالیتها مواجه هستیم، هر گونه جدا شده، خود را به صورت یک پیک در کروماتوگرام نهایی نشان میدهد. در سرعت جریان کمتر فاز متحرک، فاصله بین پیکها افزایش یافته و جداسازی بهتری خواهیم داشت.به عنوان فاز متحرک، مخلوطی از حلالها در ازای یک حلال خالص میتواند بهکار گرفته شود. نسبت اجزاء فاز متحرک در طی یک تزریق ممکن است ثابت باشد که در این صورت به آن روش ایزوکراتیک (Isocratic) گفته میشود. در حالتی دیگر که به آن روش گرادیانت (Gradient) گفته میشود.طی یک تزریق و با پیشرفت زمان، طبق برنامهای که از قبل برای سیستم تعریف شده است، درصد متفاوتی از دو یا چند حلال مخلوط شده و در سیستم توسط پمپ جریان مییابد.
تزریق نمونه، بسته به نوع دستگاه، به دو شکل دستی و یا خودکار انجام میگیرد. در روش خودکار، نمونه در ظروف مخصوصی ریخته شده و در محل تعبیه شده در دستگاه قرار میگیرد. پس از اینکه اپراتور دستور تزریق را (از طریق نرمافزار) میدهد، نمونه توسط یک سرنگ به سیستم منتقل میشود.در روش دستی، از سرنگهایی با ظرفیتهای مختلف برای تزریق نمونه استفاده میشود. حجم نمونه تزریق شده (در هر دو روش)، به حجم حلقه نمونهبردار (Loop) بستگی دارد.
پس از تزریق، نمونه ابتدا وارد قسمتی به نام پیشستون (pre-column) یا ستون محافظ (Guard column) میشود. نقش این ستون، محافظت از ستون اصلی است. طول این ستون معمولا در حد سانتیمتر است و جنس آن از فولاد زنگ نزن است. ماده پرکننده (Packing) ستون محافظ از جنسی مشابه ماده پرکننده ستون اصلی است.هم جنس بودن نوع پرکننده این مزیت را دارد که اگر مادهای که با ذرات ستون وارد واکنش شود در نمونه موجود باشد، در ابتدا در ستون محافظ به دام افتاده وستون اصلی را دچار آسیب نمیکند. طول ستونهای اصلی دستگاه معمولا حدود ۳۰-۱۰ سانتیمتر بوده و درون ستون را با موادی که به یکی از دو فرم پوستهدار و یا متخلخل است، پر کردهاند.سایز این مواد پرکننده که بر کیفیت جداسازی تاثیر فراوانی دارد، متفاوت بوده و معمولا در حد ۳ تا ۵ میکرومتر است.
ستون میتواند قطبی و یا غیرقطبی باشد. از مرسومترین ستونهای غیرقطبی میتوان به C18، اکتادسیل سیلان (ODS) اشاره کرد. جنس ستونها از فولاد ضدزنگ (Stainless Steel) است. پس از ورود نمونه به ستون، براساس تفاوت قطبیت، اجزاء مختلف نمونه در زمانهای متفاوتی با نام زمان بازداری (Retention Time) از یکدیگر جدا شده و برای تشخیص نوع ماده به سمت آشکارساز(Detector) هدایت میشوند. در نهایت پس از اتمام کار باید ستون را شستشو دهیم. برای شستشو، بسته به نوع ستون، حلال متفاوتی را با ترتیب خاص انتخاب میکنیم. برای مثال در ستونهای غیرقطبی پس از اتمام کار، ابتدا ستون را با یک حلال قطبی (معمولا آب) و سپس با یک حلال غیرقطبی (معمولا متانول) شستشو میدهند.شرکت منشور طب کوروش علاوه بر فروش دستگاه HPLC ، ستون های موررد نظر شما را نیز تامین می کند.
شرکت منشور طب کوروش با هدف شناسایی و تامین نیازهای آزمایشگاه های علمی کشور و با تکیه بر دانش، تجربه و تخصص کادر مجرب و کارآزموده خود آماده ارائه خدمات متنوعی از قبیل فروش، کالیبراسیون،آموزش، مشاوره تخصصی، نگهداری و تعمیرات دستگاه های کروماتوگرافی به صورت یکپارچه و بر اساس متد های علمی ، به روز و بر اساس استانداردهای بین المللی می باشد.
شنبه-چهارشنبه
17:00-8:00
تمام حقوق معنوی این سایت متعلق به شرکت منشورطب کوروش میباشد.(منشورطب کوروش2024-2020)
Made with by shaghayegh khanahmadi
شرکت منشور طب کوروش با هدف شناسایی و تامین نیازهای آزمایشگاه های علمی کشور و با تکیه بر دانش، تجربه و تخصص کادر مجرب و کارآزموده خود آماده ارائه خدمات متنوعی از قبیل فروش، کالیبراسیون،آموزش، مشاوره تخصصی، نگهداری و تعمیرات دستگاه های کروماتوگرافی به صورت یکپارچه و بر اساس متد های علمی ، به روز و بر اساس استانداردهای بین المللی می باشد.
کلیه حقوق این سایت متعلق به شرکت منشورطب کوروش میباشد.
Made with by shaghayegh khanahmadi
شرکت منشور طب کوروش با هدف شناسایی و تامین نیازهای آزمایشگاه های علمی کشور و با تکیه بر دانش، تجربه و تخصص کادر مجرب و کارآزموده خود آماده ارائه خدمات متنوعی از قبیل فروش ، کالیبراسیون ، آموزش ، مشاوره تخصصی، نگهداری و تعمیرات دستگاه های کروماتوگرافی به صورت یکپارچه و بر اساس متد های علمی ، به روز و بر اساس استانداردهای بین المللی می باشد.
کلیه حقوق این سایت متعلق به شرکت منشورطب کوروش میباشد.