عیب یابی دستگاه HPLC
علائم | راهکار |
---|---|
بالا بودن فشار دستگاه (High Pressure) |
1- اگر در دستگاه گارد ستون و ستون وجود داشته باشد باز کرده و یونیون بسته وفشار دوباره چک شود. 2- اگر بدون ستون فشار بالا بود سیستم را بصورت سیستماتیک با حذف مولفه های به ترتیب دتکتور، لاینر، اتوسمپلر وپمپ چک گردد. |
پایین بودن فشار دستگاه (Low Pressure) |
1- چک کردن تمامی قسمت ها که آیا لیک وجود دارد؟ 2- چک کردن لاین های پمپ که آیا حباب هوا وجو دارد؟ که با هواگیری رفع خواهد شد. 3- بالا بودن دمای ستون باعث افت فشار خواهد شد. |
پایداری(Retention Time) |
1-جلوگیری از تغییرات موبایل فاز. 2-فاصله بین ران های تزریق زیاد شود. 3-عمر مفید ستون افزایش یافته است. 4-وجود حباب های هوا که میتواند از فیلتر اینلت یا دیگسر باشد. |
دوشاخه شدن پیک (Split peek) |
1- طول عمر ستون کاهش یافته که شستشو داده شود یا تعویض شود. 2- گرفتگی ستون که با رفع گرفتگی مشکل برطرف می شود. 3- در موبایل فاز تغییرات ایجاد شده است. |
پهن شدن پیک (Broad Peek) |
1- موبایل فاز راتغییر دهید. 2- حجم تزریق راکاهش دهید. 3- غلظت بافر راافزایش دهید. 4- دماسی ستون را افزایش دهید. 5- ستون را شستشو دهید یا تعویض کنید. |
تغییرات در ارتفاع پیک (Change in Peak Height) |
1- نمونه دوباره چک شود. 2- ستون شستشو یا تعویض گردد. 3- لاین های ارتباطی چک گردد. 4- اتوسمپلر چک گردد. |
نوسانات بیس لاین (Baseline Drift) |
1-دمای ستون وموبایل فاز کنترل شود. 2-از بافر وموبایل فاز فیلتر شده استفاده شود. 3-سل دکتور با متانول شستشو داده شود. 4-ممکن است لامپ نیاز به تعویض داشته باشد. |
تیلینگ در پیک (Tailing Peek) |
1-طول عمر ستون کاهش یافته که شستشو داده شود یا تعویض شود. 2-PHموبایل فاز اشتباه انتخاب شده است. 3-نمونه بسیار غلیظ است که باید در موبایل فاز حل شود. |
پیک اضافه (Ghost Peak) |
1- در بین تزریق ها یک تزریق با فاز متحرک انجام شود. 2- نمونه دوباره چک شود. |
درهم رفتگی پیک ها (Change in Selectivity) |
1- موبایل فاز راتغییر دهید. 2- دمای ستون وموبایل فاز کنترل شود. |
پیک منفی (Negative Peak) |
1- پلاریته دستگاه چک شود. 2- استفاده از موبایل فاز با ضریب شکست پایین تر. 3- رقیق کردن نمونه با فاز حامل. 4- موبایل فاز دوباره چک شود. |
نحوه شستشوی ستون (Condition column) |
1- ابتدا ستون را با آب با فلو 0.25 ML/Min به مدت 1 ساعت شستشو داد شود. 2- سپس 25% متانول اضافه شده و 30 دقیقه شستشو داده شود. 3- سپس 50% متانول به مدت زمان 20دقیفه و در انتها با متانول به مدت 10 دقیق شستشو داده شود و ستون جدا شود. |